T／GDTL 011-2020 标准规范下载简介：

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T／GDTL 011-2020 抗菌、抗病毒涂料.pdf

按附录A的规定进行。

产品检验分出厂检验和型式检验。 7.1.1出厂检验项目按相关涂料产品执行标准中规定的出厂检验项目进行。 7.1.2型式检验项目包括本标准中抗菌、抗病毒或兼具抗菌和抗病毒功能所对应的全部技术要求。 7.1.3在正常生产情况下，每年至少进行一次型式检验。 7.1.4在下列情况之一时，应随时进行型式检验： 一新产品最初定型时； 一一生产配方、工艺及原材料有较大改变时； 一停产三个月后又恢复生产时。

7.2.1检验结果的判定按GB/T8170中修约值比较法进行。 7.2.2当产品抗菌性能结果均达到I级时，该抗菌涂料可判定为I级。当抗菌性能结果有1项仅达到ⅡI 级时，该抗菌涂料应判定为II级。 7.2.3当产品抗病毒性能结果均达到1级时SH/T 3609-2011 石油化工隔热耐磨衬里施工技术规程，该抗病毒涂料可判定为1级。当抗病毒性能结果均达到1 级时，该抗病毒涂料应判定为ⅡI级 7.2.4当产品抗菌性能结果和抗病毒性能结果均达到I级时，该抗菌抗病毒涂料可判定为I级。当抗菌 性能结果或抗病毒性能结果中有1项仅达到II级时，该抗菌抗病毒涂料应判定为II级。 7.2.5应检项目的检验结果均达到本标准要求时，该试验样品为符合本标准要求，

8.1.1按GB/T9750的规定进行。 3.1.2产品中使用的生物杀伤剂应按GB15258的规定进行有危害性标识。 3.1.3标志或说明书应明确施工状态下的施工配比、施工要求。 8.1.4标志或说明书应清晰标明抗菌、抗病毒或抗菌抗病毒的类型、达到的抗菌率、抗菌级别、病毒灭 活率以及耐久性技术指标， 8.1.5按本标准检验合格的产品可在包装标志上明示

按GB/T13491包装要求的规定进行，

T/GDTL 0112020

T/GDTL 0112020

附录A （规范性附录） 抗病毒涂料的试验方法

A.2.8细胞培养维持液（维持介质】

A.2.9双倍浓度维持培养基

2.12胰蛋白酶EDTA溶

A.2.14琼脂培养基

A.2.14. 1A溶液

A. 2.14. 2 B溶液

细胞培养琼脂15g，加水1000mL，混合均匀。使用高压蒸汽锅灭菌，温度121℃，压力103kPa 上述溶液在水浴中保持（50～60）℃至使用。

A.2.14.3使用前等比混合A溶液和B溶液（体积比1:1）

A.2.15SCDLP培养基

水1000mL，酪蛋白陈17.0g，大豆蛋白陈3.0g，氯化钠5.0g，磷酸氢二钾2.5g，葡萄糖2.5 脂1.0g。充分混合溶解后添加非离子表面活性剂7.0g，充分混合。在水浴中保持25℃并用氢氧 盐酸调节溶液至PH为7.0土0.2。使用高压蒸汽锅灭菌，温度121℃，压力103kPa，15min。

A.3.1从低温保存中复苏宿主细胞

将低温储存的宿主细胞置37℃水浴，使其迅速融化。在75cm细胞培养瓶里加入20mL细胞生 基（A.2.7），再加入解冻的宿主细胞。将培养瓶置于C02培养箱中，37℃培养24h。使用显微 细胞，如证实增殖再进行下一步，如没有增殖则继续培养。

A.3.2宿主细胞的传代培养

A.3.2.1确认A.3.1.1宿主细胞生长到90%以上后，弃掉培养瓶旧培养基，添加5mLPBS溶液（A.2.11） 先涤细胞，洗涤2次。添加1mL胰蛋白酶（A.2.11），将培养瓶置于C02培养箱中，在37℃申保持（5 土1）min，随时观察瓶中的细胞，如果从瓶壁脱落，加入5mL细胞生长培养基（A.2.8），轻轻吹打分 散细胞，此过程应避免细胞损伤。 A.3.2.2取一个新的细胞培养瓶，加入1mL细胞悬液（A.3.2.1），并补足细胞生长培养基（A.2.8）至 20mL。将培养瓶置于C0,培养箱中，37℃培养，视细胞生长情况可传代或换液。

A.3.3细胞培养作感染病毒滴定度测定

细胞传代后，可以铺板做病毒滴度的测定。蚀斑试验可使用6孔板，铺好细胞后，将培养板置

A.3.4测试病毒的准备

3.4.1 病毒株和宿主细月

本标准使用的病毒、宿主细胞和介质见表A.1. 依据使用要求，可增加选用其他商定病毒作检验病毒，

表A.1本标准使用的病毒、宿主细胞和介质

A.3.4.2流感病毒

A.3.4.2流感病毒

4.2.4测定病毒滴度是否大于10°PFU/mL（或TCIDso/mL），如滴度小于10°PFU/mL（或TCIDso/mL），则 治重新制备。使用前，将冷冻的病毒放入37℃水浴，使其迅速解冻。解冻后稀释至合适滴度，即 用的病毒悬液，若不立即使用，可暂存于2℃～8℃冰箱

A. 3. 4. 3 EV71 病毒

A.3.5.1产品按GB/T3186的规定进行取样，也可按商定的方法取样。取样量根据试验需要而定。 A.3.5.2按产品明示的配比或稀释比例，按规定的配比或稀释搅匀后制板，如产品未明示稀释比例时， 搅拌均匀后制板。若产品明示了稀释比例范围时，应取其中间值。 A.3.5.3除另有商定外，制备抗病毒试板（C样）底材为不锈钢片、马口铁片或铝片，抗病毒涂料施涂 般为二次涂刷，刷涂第一遍表干后再刷涂第二遍，涂膜总厚度为100m，样品表面应平整、无锈无油 污等。以木材为底材的试板，要求漆膜覆盖整块试板。试板涂刷后按GB/T9278规定的条件干燥7d。 试板尺寸为50mm×50mm A.3.5.4按A.3.5.3涂刷及干燥工艺制备纯空白对照试板（B样），该空白对照试板（B样）仅使用成膜 物质和必要溶剂，不含任何抗病毒剂、抗菌剂、防霉剂、防腐剂等添加助剂物质。试板尺寸为50mm× 0mm 注1：也可以向第三方购买的纯空白对照板。 注2：试样数量按照测试方法的规定制备。 A.3.5.5在试验前所有试板均需要进行灭菌处理，一般可采用紫外照射30min的方式。 注：也可以选择其他合适的方法

预试验的目的是确定检测样品洗脱液（中和剂）洗脱后的液体对细胞有无毒性及对样品抗 抑制效果。

A. 4. 1. 1 细胞毒性试验

取空白对照试板（B样）及抗病毒试板（C样）各3片，放在培养血中，加入10mLSCDLP肉汤或其他 经验证有效的中和剂，使用移液器吹打，以确保试样经过充分清洗。以洗脱液作为试验样液，接种细胞 板并进行培养观察，观察细胞有无病变。 若未观察到细胞毒性，继续下一步骤。 若观察到有细胞毒性，则需酌情更改、修改培养基配方或增加中和剂的使用量。若采用10mL中和 剂回收洗脱有困难，则可增加中和剂溶液用量。 若中和剂的配方修改、更改或增加，则在后续试验中应使用相同的洗脱液或中和剂

2验证细胞对病毒的敏感性和洗脱液终止杀病毒

A. 4. 1. 2. 1 试验步骤

取空白对照试板（B样）及抗病毒试板（C样）各3片，放在培养皿中，加入10mLSCDLP肉汤或其 他经验证有效的中和剂，使用移液器吹打，以确保试样经过充分清洗。从血中取5mLSCDLP肉汤回收液 到新的试管中。另取3支试管，分别加入5mLSCDLP肉汤培养基做为阴性对照。加50μL制备好的浓度 为（4～6）×10*PFU/mL（或TCIDs/mL）的病毒悬液至上述9支试管中，25℃放置30min。作用结束后， 测试阴性对照、空白对照试板（B样）及抗病毒试板（C样）的洗脱回收液中病毒的滴度。

A.4.1.2.2试验有效性的条件

将阴性对照与空白对照试板（B样）及抗病毒试板（C样）回收得到的病毒滴度作比较，其对数 足式（(1) 和式(2) 的要求:

Sn一3个SCDLP肉汤培养基阴性对照回收的平均病毒滴度对数值，单位为PFU/mL（TCIDso/mL）； Su一3个空白对照试板（B样）回收的平均病毒滴度对数值，单位为PFU/mL（TCIDso/mL）； St一3个抗病毒试板（C样）回收的平均病毒滴度对数值，单位为PFU/mL（TCIDso/mL）。 若以上结果超过0.5，中和剂的配方应该情修改或更改，或增加中和剂的量 若中和剂的配方修改或更改，或增加用量 则在正式试验中应用使用相同的中和剂

A. 4. 2 正式试验

A. 4. 2. 1 试样准备

取制备好的空对照试板（B样）6片，抗病毒试板（C样）3片，分别单独放入无菌培养血申， 朝上。

A. 4. 2. 2 试样接种

按照检测病毒的制备步骤，制备试验用病毒。试验前，将冷冻的病毒置37℃水浴，使其迅速融化。 用维持培养基将病毒悬液浓度调整在1×10°PFU/mL（或TCID50/mL）～5×10"PFU/mL（或TCID50/mL）之间 作接种液，若接种液不立即使用，可暂存于4℃冰箱。

用移液管吸取0.4mL接种液，滴到每个试样表面。 r的时40mmX40mm薄服 悬液上，并向下轻轻压薄膜使病毒悬液向四周扩散，确保病毒悬液不要从薄膜边溢出。在试样接种完并 盖上薄膜后，盖上培养血盖。 注1：接种液不能从覆盖膜边缘溢出。 量减少接种液体积，但体积不应小于0.1mL 注2.当接种液体积减小时， 的病费调度租回

A.4.2.3接种后试样的培养

余特别说明外，接种后的试板，在（25土1）℃、相对湿度不小于90%的条件下培养2h。各方也 商采用不超过24h的其它培养时间，并在报告中注明。

A. 4. 2. 4 病毒的洗脱回收

A.4.2.4.1接种后，立即对已接种的3片空白对照试板（B样）进行病毒回收。在各培养血申加入10 nLSCDLP肉汤或其他适宜而有效的中和剂，充分吹打以洗脱回收病毒。对回收得到的病毒洗脱液进行滴 度测定。测定方法见A.4.3。 注1：若中和剂的体积或成分更改，应在试验报告中记录。中和剂的体积更改时应在计算时予以考虑。 注2：可以使用其它的回收洗脱方法。回收方法的变更可能会影响所测得的抗病毒活性结果，应充分证实其有效性 才可使用，并在报告中注明。 A.4.2.4.2接种培养结束后，按照A.4.2.4.1处理3片空白对照试板（B样）和3片抗病毒试板（C样）， 然后立即对试样上的病毒滴度进行测定。

A.4.2.4.1接种后，立即对已接种的3片空白对照试板（B样）进行病毒回收。在各培养血申加入10 LSCDLP肉汤或其他适宜而有效的中和剂，充分吹打以洗脱回收病毒。对回收得到的病毒洗脱液进行滴 度测定。测定方法见A.4.3。 注1：若中和剂的体积或成分更改，应在试验报告中记录。中和剂的体积更改时应在计算时予以考虑。 注2：可以使用其它的回收洗脱方法。回收方法的变更可能会影响所测得的抗病毒活性结果，应充分证实其有效性 才可使用，并在报告中注明。 A.4.2.4.2接种培养结束后，按照A.4.2.4.1处理3片空白对照试板（B样）和3片抗病毒试板（C样）， 然后立即对试样上的病毒滴度进行测定，

A.4.3感染病毒滴度测试（蚀斑法）

A.4.3.1操作步骤

A.4.3.1.1在6孔细胞培养板的每个孔内培养单层细胞（A.3.3），并用显微镜观察细胞的生长状态。 当观察到长满的单层细胞时，弃掉旧的培养基。使用细胞维持培养基（A.2.8）清洗细胞表面2次。 A.4.3.1.2洗脱液原液及每个梯度的稀释液均接种2孔用于测试，接种量0.1mL。如果原液接种到第 个2孔，则接下来的2孔接种1/10稀释液，以此类推。最后一个2孔，接种维持培养基（A.2.8），做 性对照。 A.4.3.1.3将接种后的6孔板置于表A.2所列温度的C02培养箱中，孵育1h，使病毒吸附到细胞上。每 隔15min摇一下细胞板，让病毒悬液充分和细胞接触。接种规定时间后取2mL～3mL维持培养基（A.2.8） 加到6孔板上，清洗表面，然后弃掉多余的培养基。 A.4.3.1.4加入3mL琼脂培养基（A.2.14）做蚀斑实验，盖上盖子并放室温10min左右让琼脂培养基凝 固。待琼脂培养基凝固后，倒置细胞板，放入5%C02培养箱申，流感病毒于34℃培养4d～7d，肠道病 毒于37℃培养2d～3d。然后，从培养箱中把细胞板拿出来，放正，添加3mL的福尔马林溶液（A.2.4） 以固定细胞，令其在室温下固定至少1h。弃掉的琼脂培养基，添加3mL亚甲基蓝溶液，室温下保持15 nin对细胞染色。染色完毕，弃掉亚甲基蓝溶液（A.2.5），用水冲洗一下。确认细胞染色。计算斑的 数量（白色斑点）。 A.4.3. 1.5 计数饨斑的数量（白色斑点），取两个孔的平均值。蚀斑试验示例见图A.1。

A. 5. 2 试验结果

A.5.2.1试验有效性

试验结果应满足如下要求，认为试验有效： a）空白对照试板（B样）接种后即时测得的平均值应在2.5×10°PFU/cm²（或TCIDso/cm）至1.2×10° PFU/cm²（或TCIDso/cm"）的范围内。 b）空白对照试板（B样）接种2h测得的平均值应在2.5×10"PFU/cm（或TCIDso/cm）至1.2×10*PFU/cm (或TCIDsn/cm）

QB 1372-91 烤鸭罐头A.5.2.2病毒灭活率的计算

病毒灭活率按公式（7）计算：

A. 6抗病毒耐久性试验

进行抗病毒耐久性试验前，试板应进行如下预处理。试板应完全浸泡在盛有25℃水的玻璃水槽或 波璃容器中，试板之间互不接触，水面高出试板20mm，浸泡时间24h。浸泡后试板涂膜表面不应有起 泡、脱落、开裂等现象。取出后采用1支30W、波长为253.7nm的符合GB19258的紫外灯，紫外灯距 离试板0.8m～1.0m，照射100h，经处理的试板抗病毒耐久性性能按上述A.4章和A.5章的规定进行试 验

GB/T 1.2-2020 标准化工作导则 第2部分：以ISO∕IEC标准化文件为基础的标准化文件起草规则A.7抗病毒试验结果记录

应详细记录试验的病毒种类、宿主细胞、接种病毒液量、样品B、样品C接触后的病毒数量、病毒 试板类型、试剂名称、浓度等相关信息