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（报批稿）《人载脂蛋白AⅠ羊多抗血清制备技术规程》.pdf

蛋白AI羊多抗血清制备技术规

本文件运用于人载脂蛋白AI羊多抗血清制备中羊品种选择和饲养要求、免疫佐剂 选用、抗原乳化、抗原接种、抗体效价评估、抗血清制备的步骤和方法。

太文件无规范性引用文件。

下列术语和定义适用于本文件。 载脂蛋白AIApolipoproteinAI 用于运输血液中脂类的高密度主要载脂蛋白，A1是载脂蛋白A族中最多的一种组分： 约占HDL颗粒的65%，主要在肝脏、部分在小肠合成

选用体重30kg一40kg生长发育良好、10月龄左右的健康羊。采用群养放牧，适当 式，每天早晚观察羊的健康状况

采用高速剪切法乳化抗原。乳化容器需放置在降温夹套中，将佐剂按需要量置于乳化 容器中，用吸管以60滴/min的速度缓慢加入载脂蛋白AI抗原溶液，用漩涡混合器以1.5万

rmp/min混合均匀，抗原溶液全部加完后，再持续混合15min

每只羊免疫抗原剂量为1mg，抗原浓度为1mg/ml,为各部位平均接种。不同免疫次数 间的间隔天数和部位，见表1。

在第7次免疫后动脉采血检测抗体水平，采用琼脂扩散法进行效价测定，效价不低 可以判定为合格，可以采血。

在检测抗体水平达到效价要求后JJF 1564-2016 温湿度标准箱校准规范，采用动脉一次性采血。血液用250mL玻璃瓶收集 血液占玻璃瓶的1/5

把收集好血液的玻璃瓶，放在37°C恒温水浴锅中1h后，把玻璃瓶从水浴锅中取出； 再把血清从玻璃瓶中吸出；用低速离心机4500rmp/min，离心15min，取上清液，颜色为 乳白色或微黄色，去掉沉淀物杂质

黄色或微红色血清状液体，允许少量的絮状

全过程、血清保存和使用情况记录、归档。