液相色谱法测定葡萄酒中的有机酸

   本文研究了液相色谱法定性、定量测定葡萄酒中的有机酸。运用保存时刻和加标法定性出葡萄酒中含有的6种有机酸,如酒石酸、苹果酸、柠檬酸、琥珀酸、乳酸、碳酸、醋酸,并运用外标法定量了各物质的量,该要领操纵轻盈、快捷、慎密度好、精确度高。


     1 酸在葡萄酒中的浸染


     葡萄酒中只有少量的无机酸,如**和磷酸,大部门酸是有机酸。葡萄酒中的酸首要以游离态或以盐类的情势存在(见表1),葡萄酒中的酸首要有:酒石酸、苹果酸、柠檬酸、琥珀酸、乳酸、碳酸、醋酸。酸在葡萄酒的酿造中和酿造后都占据着重要的职位,它存在于葡萄和葡萄酒中,直接浸染于葡萄酒的颜色、葡萄酒的均衡感和葡萄酒的口感,酵母在发酵进程中的活性和掩护葡萄酒免受细菌的侵吞。


  常用“总酸”来权衡葡萄酒中酸的含量,一样平常用pH值来符号,葡萄酒的酸度值介于2.9—3.9之间,pH值越低则酸度越高,反之,pH值越高则酸越高。酿酒葡萄中最首要的三种有机酸是酒石酸、苹果酸、柠檬酸。


  在葡萄酒的酿造进程中和酿造后,葡萄酒中的醋酸、酪酸、乳酸和琥珀酸起着很重要的浸染。葡萄酒中的酸(除了醋文章来历中原酒报酸不不变,易挥发,会让葡萄酒变质)还算都是较量不变的酸类。

回归方程


 

液相色谱法理会葡萄酒中的有机酸



     可按照检测葡萄酒中有机酸的变革来确定和调查葡萄酒的发酵进程。


 


     2 检测道理


     酒石酸、苹果酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸均属水溶性有机酸,以是酒样可颠末稀释、过滤后直接进样,用高效液相色谱仪C18柱将各类有机酸疏散,经紫外检测器检测,并用尺度物的保存时刻举办定性,外标法定量测定。

葡萄酒中酸的含量及来历


 

液相色谱法理会葡萄酒中的有机酸


 


 


     3 试剂


     3.1 磷酸溶液(0.01mol/L)。
    3.2 磷酸氢二钾溶液(0.01mol/L)。
     3.3 有机酸尺度品(色谱纯):酒石酸、D—苹果酸、乳酸、乙酸、柠檬酸、琥珀酸。
    3.4 超纯水。
     3.5 尺度溶液的配制:


     尺度储蓄液:别离称取6种有机酸100mg用超纯水,定容至10ml使其浓度为10mg/ml。
     尺度殽杂液:别离汲取10 mg/ml单标100ul,加超纯水定容至1ml,使其浓度为1mg/ml。
     事变曲线的配制:用微量移液器别离称取尺度殽杂液0.0ul、100ul、200ul、300ul、400ul、500ul、600ul 并定容至1ml,各稀释液经0.45μm的过滤膜过滤后直接进样。


     4 检测用仪器、装备
     4.1 高效液相色谱仪带紫外检测器VARIAN PROSTAR。
     4.2 酸度计 PHS—3CT。
     4.3 溶剂过滤器。
     4.4 可调式移液器。


 

液相色谱法理会葡萄酒中的有机酸


 


 


     5 色谱前提
     5.1 色谱柱:汉邦lunaS  C18柱,250mm*4.6mm*5um。
     5.2 活动相:将0.01mol/L磷酸溶液(将0.714  ml  85%H3PO4溶至1000 ml)和0.01mol/L磷酸氢二钾溶液(将2.2822g  K2HPO4·3H2O消融后定容至1000ml),殽杂调至pH=2.70的缓冲溶液,临用前过滤,脱气后行使或亦可用在线脱气法。
     5.3 柱温:25.0℃。
     5.4 流速:0.8ml/min。
     5.5 紫外检测波长:215nm。
     5.6 进样量:20μl。


     6 酒样的处理赏罚
  将必要检测的葡萄酒样经5倍(可按照有机酸含量的坎坷确定稀释的倍数)稀释后,用0.45μm的过滤膜过滤后进样测定。


     7 说明步调
     7.1 尺度曲线的制备将配制好的有机酸的事变曲线溶液由稀到浓别离进样测定,得其色谱图。
     以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,做酒石酸、苹果酸的尺度曲线,并计较出回归方程(见图1)。
     7.2 酒样说明:将处理赏罚酒样(即将待检葡萄酒样稀释10倍后,用0.45um的滤膜过滤)进样得色谱图。
     定性:比较尺度色谱图中各有机酸的保存时刻定性。
     定量:求出酒样中各个有机酸的峰面积,按照回归方程计较求出其含量。


     8 功效计较
  可按照要求算出样品重量含量或体积含量,以葡萄酒小样1#、2#为例(见表2)。


     9 留意事项
     9.1 活动相的pH细小变革对测定影响不大,但pH应不低于2.5。
     9.2 应现处理赏罚酒样,现进样,不然有机酸易于挥发,影响测定的功效。

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