熟牛肉中的五种人工合成色素的测定

 

1. 合用范畴
合用于熟牛肉中的五种人工合成色素(柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄 、亮蓝)的测定。


2. 提取
准确称取2±0.2 g 毁坏后的熟牛肉,于50 mL聚丙烯离心管中,插手5 mL丙酮:水(90:10)殽杂溶液,涡动1min,均质1min(1000rpm),4000 rpm离心5 min,转移上清液于50 mL离心管中,残渣用5 mL丙酮:水(90:10)殽杂溶液一再提取两次,归并上清液。上清液中插手10 mL石油醚(60-90℃),上下翻转5次,4000rpm离心3min,撤除石油醚层,基层于80 ℃氮吹至2 mL以下,插手定容至5 mL,混匀,待净化。


3. 净化
预处理赏罚:向Welchrom® P-WAX(60mg/3mL)中插手3 mL甲醇、3 mL水,流出液弃去;
上样:将上述提取液插手柱中,流出液弃去,用5 mL水涮洗样品管,转入SPE柱;
淋洗:3 mL甲醇、3 mL甲醇:甲酸(6:4)依次过柱、3 mL正己烷过柱,小柱真空干燥5 min;
洗脱: 3*1 mL 5%甲醇洗脱,网络;
从头消融:80 ℃氮吹至干,1 mL水复溶,涡动30 s,过0.22μm滤膜,待说明;


4. 检测
色谱前提:
色谱柱: Ultimate® XB-C18 液相色谱柱(4.6 mm x 150 mm 3 μm)

 

时刻(min)    活动相A(%)    活动相B(%)

0                            92                            8

1                            92                            8

4                           80                             20

9                           10                             90

11                         10                             90

11.1                      92                              8

17                           92                            8

 


活动相:
A: 0.02mol/L乙酸铵水溶液(乙酸调理pH=4)
B: 甲醇
梯度洗脱措施见右图
流速:0.7 mL/min
进样量: 20 μL
柱温: 40°C
检测波长: 254 nm
运行时刻:17 min 
5. 附图

 


1. 柠檬黄; 2.苋菜红; 3.胭脂红;4. 日落黄 ;5.亮蓝
要领中行使到的耗材
1、 柠檬黄尺度品:WEL-S-0001
苋菜红尺度品:WEL-S-0002
胭脂红尺度品:WEL-S-0003
日落黄尺度品 :WEL-S-0004
亮蓝尺度品:WEL-S-0005
2、 固相萃取小柱:Welchrom® P-WAX(60mg/3mL,P/N:WSP050306)
3、 液相色谱柱:Ultimate® XB-C184.6 mm x 150 mm 3 μm(Ult3B18415)
4、 13mm,孔径0.22μm尼龙针孔滤膜(P/N: WEL-SFNY213022)
5、 12孔固相萃取装置(WEL-Vac-12)

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